根据标记物的不同核酸探针可分为()。
A、碱性磷酸酶探针和辣根过氧化物酶探针
B、放射性探针和非放射性探针
C、DNA探针和RNA探针
D、单链探针和双链探针
E、生物素探针和地高辛探针
关于探针的叙述错误的是
A、要加以标记、带有示踪物,便于杂交后检测
B、应是单链,若为双链用前需先行变性为单链
C、具有高度特异性,只与靶核酸序列杂交
D、探针长度一般是十几个碱基到几千个碱基不等
E、作为探针的核苷酸序列要选取基因非编码序列
核酸探针是指
A. 不同的核酸链经变性处理,它们之间形成局部的双链
B. 一小段核苷酸聚合体的单链,用放射性核素或生物素来标记其末端或全链
C. 运输氨基酸
D. 单股DNA恢复成双股DNA
E. 50%双链DNA变性时的温度
关于探针的叙述不正确的是()。
A、探针长度一般是十几个碱基到几千个碱基不等
B、要加以标记、带有示踪物,便于杂交后检测
C、具有高度特异性,只与靶核酸序列杂交
D、应是单链,若为双链用前需先行变性为单链
E、作为探针的核苷酸序列要选取基因非编码序列
B、根据SNP位点设计特异引物,其中一条链(特异链)的3′末端与SNP位点的碱基互补(或相同),另一条链(普通链)按常规方法进行设计,因此,AS-PCR技术是一种基于SNP的PCR标记。因为特异引物在一种基因型中有扩增产物,在另一种基因型中没有扩增产物,用凝胶电泳就能够很容易地分辨出扩增产物的有无,从而确定基因型的SNP
C、杂交测序方法,即通过与一组已知序列的核酸探针杂交进行核酸序列测定的方法,在一块基片表面固定了序列已知的靶核苷酸的探针。当溶液中带有荧光标记的核酸序列TATGCAATCTAG,与基因芯片上对应位置的核酸探针产生互补匹配时,通过确定荧光强度最强的探针位置,获得一组序列完全互补的探针序列
D、是将变性的单链PCR产物通过与硅芯片上的化合物共价结合后,在硅芯片上进行引物的退火,延伸反应,突变部位配对的碱基与正常配对的碱基不相同。根据引物在延伸反应中所结合的不同碱基的不同质量在质谱仪上显示不同峰而检测SNP
E、目标核酸片段PCR扩增,部分加热变性后,含有突变碱基的DNA序列由于错配碱基与正常碱基不能配对而形成异源双链。因包含错配碱基的杂合异源双链区比完全配对的同源配对区和固定相的亲和力弱,更易被从分离柱上洗脱下来,从而达到分离的目的。SNPs的有无最终表现为色谱峰的峰形或数目差异,依据此现象可很容易从色谱图中判断出突变的碱基
A.核酸提取中的随机误差,如核酸提取中的丢失,有机溶剂的去除不彻底,标本中扩增抑制物的残留,所用耗材如离心管有PCR抑制物等
B.质控的问题,如使用浓度较高的阳性质控
C.仪器的问题,如扩增仪孔间温度的不一致性,孔内温度与所示温度的不-致性等
D.操作的问题,如加样时试剂泼洒导致污染
E.试剂的问题,如Taq酶和/或反转录酶的失活,探针的纯度及标记效率和核酸提取试剂的效率等
原位杂交和原位间接PCR的不同在于
A、有无杂交反应
B、能否显示检测靶点定位
C、有无DNA扩增过程
D、有无探针应用
E、有无标记物应用
用来检测待测核酸同源程度的一小段已标记的核苷酸序列
A、探针
B、盐析
C、Tm值
D、遗传密码
E、亚基